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Warum lysiert die Zellkultur zuerst rote Blutkörperchen?

2022-12-23

Grundlegende Einführung
Erythrozytenlysat ist eine der einfachsten und einfachsten Methoden, um rote Blutkörperchen zu entfernen, dh rote Blutkörperchen mit Lysat zu spalten, das kernhaltige Zellen nicht schädigt und rote Blutkörperchen vollständig entfernen kann. Die Lysatspaltung ist eine milde Methode zur Entfernung roter Blutkörperchen, die hauptsächlich zur Trennung und Reinigung von durch Enzymverdauung dispergierten Gewebezellen, zur Trennung und Reinigung von Lymphozyten und zur Entfernung roter Blutkörperchen in Gewebeprotein- und Nukleinexperimenten verwendet wird Säureextraktion. Die durch das Lysat roter Blutkörperchen erhaltenen Gewebezellen enthalten keine roten Blutkörperchen und können weiter für Primärkultur, Zellfusion, Durchflusszytometrie, Trennung und Extraktion von Nukleinsäure und Protein usw. verwendet werden.

Gebrauchsanweisung
Gewebezellprobe
1. Frisches Gewebe wurde durch Pankreas/Enzym oder Collagenase verdaut und in Einzelzellsuspension dispergiert, und der Überstand wurde durch Zentrifugation verworfen.

2. ELS-Lysat bei 4 °C aus dem Kühlschrank nehmen, ELS-Lysat in einem Verhältnis von 1:3-5 zum Zellpräzipitat geben (3-5 ml Lysat zu 1 ml verdichteter Zelle hinzufügen), vorsichtig blasen und mischen.

3. Zentrifugieren Sie bei 800-1000 U/min für 5-8 Minuten und entsorgen Sie die obere rote klare Flüssigkeit.

4. Der ausgefällte Teil wurde gesammelt und mit Hank-Lösung oder serumfreier Kulturlösung 2-3 Mal zentrifugiert.

5, wenn die Rissbildung nicht vollständig/vollständig ist, können die Schritte 2 und 3 wiederholt werden.

6. Resuspensionszellen für nachfolgende Experimente; Wenn RNA extrahiert wird, erfolgt dies am besten in der Lösung, die in Schritt 4 mit DEPC-Wasser hergestellt wurde

Rote Blutkörperchen haben einen sehr kurzen Lebenszyklus, nur 120 Tage, aber sie reproduzieren Blut sehr schnell, und in diesem Fall sind sie besonders zellteilungsfähig, und sie sind die sich am schnellsten teilenden Zellen von allen, daher ist diese Zelle sehr wertvoll, daher ist es sehr nützlich für die Zellkultur. Es ist sehr einfach, es enthält keine Organellen, nur Zellmembranen und Proteine.

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