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Was sind die Funktionen des ELISA-Kits?

2022-12-23

Das ELISA-Kit basiert auf der Festphase des Antigens oder Antikörpers und der Enzymmarkierung des Antigens oder Antikörpers. Das an die Oberfläche des festen Trägers gebundene Antigen oder der Antikörper behält immer noch seine immunologische Aktivität, und das enzymmarkierte Antigen oder der Antikörper behält sowohl seine immunologische Aktivität als auch die Enzymaktivität. Zum Zeitpunkt der Bestimmung reagiert die zu testende Probe (in der der Antikörper oder das Antigen gemessen wird) mit dem Antigen oder Antikörper auf der Oberfläche des festen Trägers. Der auf dem festen Träger gebildete Antigen-Antikörper-Komplex wird durch Waschen von anderen Substanzen in der Flüssigkeit getrennt.

Es werden enzymmarkierte Antigene oder Antikörper zugesetzt, die ebenfalls durch Reaktion an den festen Träger binden. Zu diesem Zeitpunkt ist die Enzymmenge in der Festphase proportional zur Substanzmenge in der Probe. Nach der Zugabe des Substrats der Enzymreaktion wird das Substrat durch das Enzym katalysiert, um gefärbte Produkte zu werden. Die Menge des Produkts steht in direktem Zusammenhang mit der Menge der getesteten Substanz in der Probe, sodass je nach Farbtiefe eine qualitative oder quantitative Analyse durchgeführt werden kann.

Die hohe katalytische Effizienz von Enzymen verstärkt indirekt die Ergebnisse der Immunantwort, wodurch der Assay hochempfindlich wird. ELISA kann zur Bestimmung von Antigenen, aber auch zur Bestimmung von Antikörpern verwendet werden.

Grundprinzipien des ELISA-Kits
Es verwendet eine spezifische Reaktion von Antigen und Antikörper, um das Objekt mit dem Enzym zu verbinden, und erzeugt dann eine Farbreaktion zwischen Enzym und Substrat zur quantitativen Bestimmung. Das Messobjekt kann ein Antikörper oder Antigen sein.

Bei dieser Bestimmungsmethode sind drei Reagenzien erforderlich:
â Festphasenantigen oder -antikörper (Immunadsorbens)
â¡ Enzymmarkiertes Antigen oder Antikörper (Marker)
â¢ Substrat für Enzymwirkung (Farbentwicklungsmittel)

Bei der Messung wird zunächst das Antigen (Antikörper) an den festen Träger gebunden, behält aber noch seine Immunaktivität, und dann wird ein Konjugat (Marker) aus Antikörper (Antigen) und Enzym zugegeben, das noch seine ursprüngliche Immunaktivität und Enzym behält Aktivität. Wenn das Konjugat mit dem Antigen (Antikörper) auf dem festen Träger reagiert, wird das entsprechende Substrat des Enzyms hinzugefügt. Das heißt, katalytische Hydrolyse oder REDOX-Reaktion und Farbe.

Der erzeugte Farbton ist proportional zur Menge des zu messenden Antigens (Antikörper). Dieses gefärbte Produkt kann mit bloßem Auge, optischem Mikroskop, Elektronenmikroskop beobachtet werden und kann auch mit einem Spektrophotometer (Enzymmarkierungsinstrument) gemessen werden. Die Methode ist einfach, bequem, schnell und spezifisch.

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